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          單脫氫抗壞血酸還原酶(MDHAR)測試盒?操作步驟

          更新時間:2021-11-24點擊次數(shù):785

          單脫氫抗壞血酸還原酶(MDHAR)測試盒操作步驟:

          1、貼壁細胞的消化

          ①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。

          ②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。

          ③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變

          化;或者用槍吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛好可以被吹打下來,吸除胰酶細胞消化液。加入含血清的  *細胞培養(yǎng)液,吹打下細胞,即可直接用于后續(xù)實驗。

          ④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。

          ⑤如果發(fā)現(xiàn)細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用胰酶細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。000~2000g 離心 min,沉淀細胞,盡量去除胰酶細胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細胞,即可用于后續(xù)實驗。

          2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。

          GH3, 大鼠垂體生長激素腺瘤

          Hepa 1-6, 小鼠肝癌細胞

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          A549/DDP, 人肺腺癌耐藥細胞株

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          WM35, 人黑色素瘤細胞

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          UM-UC-3, 人膀胱移行細胞癌

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          SKOV3 [SK-OV-3], 人卵巢癌腺癌細胞系

          786-O [786-0], 人腎透明腺癌細胞

          HEC-1A, 人子宮內(nèi)膜癌細胞系

          Caki-1, 人腎透明細胞癌皮膚轉(zhuǎn)移細胞


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