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魯氏不動(dòng)桿菌PCR檢測(cè)試劑盒廠家上海聯(lián)祖生物相關(guān)產(chǎn)品:人布魯氏菌抗體IgG(Brucella Ab IgG)elisa試劑盒Anti-ADIPOQ Antibody(原貨號(hào)PB0002)研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 染色質(zhì)和核信號(hào) 表觀遺傳學(xué)玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基2250g供藥品和生物制品中霉菌和酵母菌的計(jì)數(shù)、分離和培養(yǎng)用。Nutrient Agar Tablets 營(yíng)養(yǎng)瓊脂 Oxoid 100片
產(chǎn)品分類
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1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測(cè)稀釋液B:1×10ml。
注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
產(chǎn)品名稱 | 魯氏不動(dòng)桿菌PCR檢測(cè)試劑盒廠家 |
英文名稱 | Acinetobacter lwoffiPCR |
貨號(hào) | LZP6330 |
實(shí)驗(yàn)過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
三、注意事項(xiàng)
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行設(shè)立一個(gè)的PCR實(shí)驗(yàn)室。
2.純化模板所選用的方法對(duì)污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡(jiǎn)單越好。
3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗(yàn)一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量?jī)?chǔ)存,從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。檢測(cè)步驟:
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對(duì)照+1管陽性對(duì)照),每個(gè)測(cè)試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計(jì)算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對(duì)照(NTC)和陽性對(duì)照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時(shí)收集熒光信號(hào)。報(bào)告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請(qǐng)勿選擇ROX參比熒光。
人己糖激酶(HK)elisa試劑盒Anti-ADAM2 Antibody研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 細(xì)胞周期蛋白 細(xì)胞分化 表觀遺傳學(xué)
人11(KLK 11)elisa試劑盒Anti-ADAM2 Antibody研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 細(xì)胞周期蛋白 細(xì)胞骨架 細(xì)胞外基質(zhì)
人基質(zhì)金屬蛋白酶14(MMP-14)elisa試劑盒Anti-ADAM28 Antibody研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 細(xì)胞周期蛋白 細(xì)胞分化
人基質(zhì)金屬蛋白酶12(MMP-12)elisa試劑盒Anti-ADAM8 Antibody研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞分化 細(xì)胞外基質(zhì)
人黑色素瘤相關(guān)抗原D4(MAGED4/MAGED4B)elisa試劑盒Anti-ADAMTS1 Antibody研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 細(xì)胞周期蛋白 細(xì)胞骨架 細(xì)胞外基質(zhì)
人核糖體蛋白S9(RPS9)elisa試劑盒Anti-ADAMTS1 Antibody研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 細(xì)胞周期蛋白 細(xì)胞分化
人胱天蛋白酶3(Casp-3)elisa試劑盒Anti-ADAM9 Antibody研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 細(xì)胞周期蛋白 細(xì)胞分化 表觀遺傳學(xué)
人骨橋素(OPN)elisa試劑盒Anti-ADAMTS2 Antibody研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 免疫學(xué)
人肺炎衣原體(Cpn)抗體(IgG)elisa試劑盒Anti-ADAMTS2 Antibody研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 發(fā)育生物學(xué) 神經(jīng)生物學(xué)
人二氫嘧啶脫氫酶NADP+(DPYD)elisa試劑盒Anti-ADAMTS13 Antibody研究領(lǐng)域 神經(jīng)生物學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 通道蛋白 細(xì)胞膜蛋白
人低分子質(zhì)量蛋白7/β型蛋白酶體9(LMP7/PSMB9)elisa試劑盒Anti-ADAMTS4 Antibody研究領(lǐng)域 神經(jīng)生物學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)
人脆性x三聯(lián)體(FHIT)elisa試劑盒Anti-ADAR Antibody研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 神經(jīng)生物學(xué) 通道蛋白 細(xì)胞膜蛋白
人腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)elisa試劑盒Anti-ADH1A Antibody研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞骨架 細(xì)胞外基質(zhì)
人腸三葉因子(ITF)elisa試劑盒Anti-ADAMTS4 Antibody研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 神經(jīng)生物學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞膜受體 Alzheimer's
人布魯氏菌抗體IgG(Brucella Ab IgG)elisa試劑盒Anti-ADIPOQ Antibody(原貨號(hào)PB0002)研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 染色質(zhì)和核信號(hào) 表觀遺傳學(xué)
玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基2250g供藥品和生物制品中霉菌和酵母菌的計(jì)數(shù)、分離和培養(yǎng)用。
Nutrient Agar Tablets 營(yíng)養(yǎng)瓊脂 Oxoid 100片 incubation media Nutrient Agar Tablets 營(yíng)養(yǎng)瓊脂 Oxoid 100片
棉花立枯菌 葡萄酒酵母 支/瓶
大腸桿菌O培養(yǎng)基
抗生素檢定培養(yǎng)基3號(hào)(usp) 250g 藥品抗生素效價(jià)測(cè)定
x麥康克瓊脂基礎(chǔ) SMAC 250克 大腸桿菌O157:H7的選擇性分離培養(yǎng)
MUG培養(yǎng)基 MUG-Medium(with Kovacs) 培養(yǎng)基20g+靛基質(zhì)20m 大腸埃希氏菌快速熒光測(cè)定
三糖鐵培養(yǎng)基 Triple Sugar Iron Agar 250克 腸桿菌科細(xì)菌的生化試驗(yàn)
SS瓊脂 Salmonella Shigella Agar 250克 沙門氏菌屬和志賀氏菌屬的分離培養(yǎng)
魯氏不動(dòng)桿菌PCR檢測(cè)試劑盒廠家4-Bromo-2-fluorotoluene,99%通用試劑 5G
3-Bromo-4-fluorotoluene,99%通用試劑 5G
3-Bromo-2-fluorotoluene,97%通用試劑 1G
2-Bromo-6-fluorotoluene,98%通用試劑 1G
2-Bromo-5-fluorotoluene,98%通用試劑 5G
2-Bromo-4-fluorotoluene,98%通用試劑 5G
5-Fluoro-2-methylaniline,99%通用試劑 5G
4-Fluoro-3-methylaniline,97%通用試劑 5G
4-Fluoro-2-methylaniline,96%通用試劑 5G
3-Fluoro-2-methylaniline,99%通用試劑 5G
2-Fluoro-6-methylaniline,97%通用試劑 250MG
2-Fluoro-4-methylaniline,99%通用試劑 1G
2-Fluoro-3-methylaniline,98%通用試劑 1G
2-Hydroxybenzotrifluoride,≥96.5 %通用試劑 1G
2-(Trifluoromethyl)benzamide,97%通用試劑 1G