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    白樂杰馬杜拉放線菌PCR檢測試劑盒規(guī)格

    產(chǎn)品簡介

    白樂杰馬杜拉放線菌PCR檢測試劑盒規(guī)格
    上海聯(lián)祖生物相關(guān)產(chǎn)品:
    CD44檢測試劑盒
    13-乙酰基-9-羥基巴卡丁III
    18B-甘草次酸
    1-脫氧野尻霉素

    更新時間:2021-03-14
    訪問次數(shù):891
    詳細介紹在線留言

    組成及試劑配制:
    1、酶標板:一塊(96孔)
    2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
    3、 樣品稀釋液:1×20ml。
    4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
    5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
    注意事項:1.基礎(chǔ)程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學;8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。 ?

     產(chǎn)品名稱

     白樂杰馬杜拉放線菌PCR檢測試劑盒規(guī)格

     英文名稱

     Actinomadura pelletieriPCR

     貨號

     LZP6336

    實驗過程:
    一、試劑準備
    1. DNA模板
    2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
    3.10×PCR Buffer
    4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
    5.Taq酶
    二、操作步驟
    1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
    10×PCR buffer             5μl
    dNTP mixl                 4μl
    引物1(10pM)               2μl
    引物2(10PM)              2μl
    Taq酶(2U/μl)            1μl
    DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
    ddH2O至               50 μl
    PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
    2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
    3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
    4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
    三、注意事項
    1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行設(shè)立一個的PCR實驗室。
    2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
    3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
    4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
    5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
    6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
    7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。檢測步驟:
    一、 試劑的準備
    從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
    設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應(yīng)體系配制如下表:
    試劑 每個反應(yīng)加入的量 N個反應(yīng)加入的量
    熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
    酶混合物 1 µL N×1 µL
    總量 15 µL N×15µL
    1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
    7.2 qPCR反應(yīng)條件
    將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
    推薦循環(huán)條件:
    1循環(huán) 50℃ for 2 min
    預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
    PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
    60℃ for 60 sec
    60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設(shè)置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
    人登革熱抗體IgM(DF-Ab IgM)elisa試劑盒Anti-ALDH1A1 Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 細胞生物 免疫學 染色質(zhì)和核信號 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 細胞凋亡 表觀遺傳學

    人登革熱(DF)抗體(IgG)elisa試劑盒Anti-ALCAM Antibody研究領(lǐng)域 細胞生物 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 細胞類型標志物 細胞骨架

    人蛋白酶3(PR3)elisa試劑盒Anti-ALDH18A1 Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 細胞生物 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 激酶和磷酸酶

    人蛋白精氨酸甲基轉(zhuǎn)移酶1(PRMT1)elisa試劑盒Anti-ALDH1A1 Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 細胞生物 免疫學 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 激酶和磷酸酶 細胞骨架 細胞外基質(zhì) 泛素

    人大腸癌專一抗原4(CCSA-4)elisa試劑盒Anti-ALDH1A3 Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 細胞生物 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 激酶和磷酸酶

    人成纖維細胞生長因子13(FGF-13)elisa試劑盒Anti-ALDH1A2 Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 免疫學 神經(jīng)生物學 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子

    人補體蛋白4(C4)elisa試劑盒Anti-ALDH1B1 Antibody研究領(lǐng)域 細胞生物 神經(jīng)生物學 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 通道蛋白 轉(zhuǎn)運蛋白

    人丙二酸單酰輔酶A(malonyl CoA)elisa試劑盒Anti-ALDH1L1 Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 細胞生物 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子

    人瘢痕性天皰瘡抗體(CP)elisa試劑盒Anti-ALDH2 Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 心血管 細胞生物 免疫學 神經(jīng)生物學 通道蛋白

    人白介素2可溶性受體α鏈(IL-2sRα/CD25)elisa試劑盒Anti-ALDH2 Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 免疫學 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子

    γ谷氨酸-半胱氨酸合成酶(γ-GCS)elisa試劑盒Anti-ALDH3A2 Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 細胞生物 免疫學 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 細胞粘附分子

    γ干擾素受體(IFN-γR)elisa試劑盒Anti-ALDH3A1 Antibody研究領(lǐng)域 免疫學 通道蛋白

    α1β糖蛋白(α1β-GP)elisa試劑盒Anti-ALDH6A1 Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 神經(jīng)生物學 生長因子和激素 內(nèi)分泌病

    TU3A蛋白(TU3A)elisa試劑盒Anti-ALDH7A1 Antibody(原貨號PB1093)研究領(lǐng)域 腫瘤 神經(jīng)生物學 生長因子和激素 內(nèi)分泌病

    Toll樣受體3(TLR3)elisa試劑盒Anti-ALDOB Antibody研究領(lǐng)域

    沙門氏志賀氏增菌液250g志賀氏菌和沙門氏菌增菌培養(yǎng)

    Nitrogen-fixingRhizobiummedium

    產(chǎn)毒培養(yǎng)基 Toxin-Producing Medium 250 青霉、曲霉的產(chǎn)毒培養(yǎng)

    TGC培養(yǎng)基250g/瓶無菌檢驗(日本)incubationmediaTGC培養(yǎng)基250g/瓶無菌檢驗(日本)

    MFCAgar

    亮綠瓊脂培養(yǎng)基  Brilliant Green Agar  250克  沙門氏菌分離培養(yǎng)

    梭菌培養(yǎng)基  Clostridium Enrichment Medium  250克  梭菌增菌培養(yǎng)

    哥倫比亞瓊脂培養(yǎng)基  Columbia Agar Medium  250克  營養(yǎng)要求較高的細菌的培養(yǎng)基及溶血試驗,梭菌的檢測

    哥倫比亞4-甲基傘形葡糖苷酸培養(yǎng)基  Columbia-MUG Medium  250克  大腸桿菌的熒光檢測
    白樂杰馬杜拉放線菌PCR檢測試劑盒規(guī)格血型Lewis A抗原抗體Hikiflavone中文名:扁柏雙黃酮別名:分子式:C30H18O10

    粘蛋白/巖藻糖基轉(zhuǎn)移酶3抗體6-Methyl-7-O-methylaromadendrin中文名:別名:分子式:C17H16O6

    Bloom綜合征相關(guān)蛋白抗體Dehydrotoxicarol中文名:別名:分子式:C23H20O7

    骨形態(tài)發(fā)生蛋白8b抗體Kushel A中文名:別名:分子式:C25H28O5

    磷酸化非受體性蛋白酪氨酸激酶ETK抗體Erysenegalensein E中文名:別名:分子式:C25H26O6

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