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          當(dāng)前位置:首頁(yè)  -  產(chǎn)品中心  -  PCR試劑盒  -  PCR檢測(cè)試劑盒  -  50T睡眠嗜血桿菌PCR檢測(cè)試劑盒規(guī)格

          睡眠嗜血桿菌PCR檢測(cè)試劑盒規(guī)格

          產(chǎn)品簡(jiǎn)介

          睡眠嗜血桿菌PCR檢測(cè)試劑盒規(guī)格
          上海聯(lián)祖生物相關(guān)產(chǎn)品:
          MF/MPF檢測(cè)試劑盒
          人角化細(xì)胞內(nèi)分泌因子(KAF)/雙調(diào)蛋白(AR)ELISA Kit,48T/96T
          小鼠角化細(xì)胞內(nèi)分泌因子(KAF)/雙調(diào)蛋白(AR)ELISA Kit,48T/96T

          更新時(shí)間:2021-03-14
          訪(fǎng)問(wèn)次數(shù):505
          詳細(xì)介紹在線(xiàn)留言

          ?
          注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

           產(chǎn)品名稱(chēng)

           睡眠嗜血桿菌PCR檢測(cè)試劑盒規(guī)格

           英文名稱(chēng)

           Haemophilus somnusPCR

           貨號(hào)

           LZP6812

          實(shí)驗(yàn)過(guò)程:
          一、試劑準(zhǔn)備
          1. DNA模板
          2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無(wú)到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
          3.10×PCR Buffer
          4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
          5.Taq酶
          二、操作步驟
          1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
          10×PCR buffer             5μl
          dNTP mixl                 4μl
          引物1(10pM)               2μl
          引物2(10PM)              2μl
          Taq酶(2U/μl)            1μl
          DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
          ddH2O至               50 μl
          PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
          2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
          3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
          4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
          三、注意事項(xiàng)
          1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒(méi)有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行設(shè)立一個(gè)的PCR實(shí)驗(yàn)室。
          2.純化模板所選用的方法對(duì)污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡(jiǎn)單越好。
          3.所有試劑都應(yīng)該沒(méi)有核酸和核酸酶的污染。操作過(guò)程中均應(yīng)戴手套。
          4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過(guò)濾除菌或高壓滅菌。
          5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗(yàn)一下是否滿(mǎn)意,然后分裝成僅夠一次使用的量?jī)?chǔ)存,從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。
          6.試劑或樣品準(zhǔn)備過(guò)程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
          7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開(kāi),并且要充分混勻。檢測(cè)步驟:
          一、 試劑的準(zhǔn)備
          從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
          設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對(duì)照+1管陽(yáng)性對(duì)照),每個(gè)測(cè)試反應(yīng)體系配制如下表:
          試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
          熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
          酶混合物 1 µL N×1 µL
          總量 15 µL N×15µL
          1) 計(jì)算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對(duì)照(NTC)和陽(yáng)性對(duì)照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
          7.2 qPCR反應(yīng)條件
          將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
          推薦循環(huán)條件:
          1循環(huán) 50℃ for 2 min
          預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
          PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
          60℃ for 60 sec
          60℃延伸時(shí)收集熒光信號(hào)。報(bào)告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請(qǐng)勿選擇ROX參比熒光。
          組成及試劑配制:
          1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
          2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋?zhuān)ㄗⅲ翰灰苯釉诎逯羞M(jìn)行倍比稀釋?zhuān)?,分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類(lèi)推。
          3、 樣品稀釋液:1×20ml。
          4、 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml。
          5、 檢測(cè)稀釋液B:1×10ml。
          -羅漢果皂甙 V 1126032-65-2價(jià)格Anti-OR2AG2 Antibody研究領(lǐng)域 免疫學(xué) 藥物及化合物

          丹參酮IIA-磺酸鈉69659-80-9價(jià)格Anti-OR2A7 Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 免疫學(xué) 染色質(zhì)和核信號(hào) 細(xì)胞凋亡 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子

          蒼術(shù)內(nèi)酯Ⅱ73069-14-4價(jià)格Anti-OR2AG2 Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 細(xì)胞粘附分子

          28-去甲基-β-香樹(shù)脂酮*Anti-OR2AJ1 Antibody研究領(lǐng)域 免疫學(xué) 神經(jīng)生物學(xué)

          長(zhǎng)春新堿57-22-7實(shí)驗(yàn)步驟Anti-OR2AJ1 Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 免疫學(xué) 染色質(zhì)和核信號(hào) 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子

          Fmoc-S-三苯甲基-L-半胱氨酸使用說(shuō)明書(shū)Anti-OR2AK2 Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 心血管 細(xì)胞生物 免疫學(xué)

          定量濾紙保存Anti-OR2AP1 Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)

          96孔血凝板價(jià)格Anti-OR2AP1 Antibody研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 染色質(zhì)和核信號(hào) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子 表觀遺傳學(xué)

          N,N-(2-羥基)-2-氨基乙磺酸保存Anti-OR2B2 Antibody研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞外基質(zhì)

          多粘菌素B〖硫酸鹽〗使用說(shuō)明書(shū)Anti-OR2C1 Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 神經(jīng)生物學(xué)

          谷氨酰胺轉(zhuǎn)移酶實(shí)驗(yàn)步驟Anti-OR2B8P Antibody研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 神經(jīng)生物學(xué) 細(xì)胞凋亡 細(xì)胞周期蛋白 細(xì)胞分化

          蔗糖酶使用說(shuō)明書(shū)Anti-OR2C3 Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 細(xì)胞生物 染色質(zhì)和核信號(hào) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子

          梭菌培養(yǎng)基保存Anti-OR2AT4 Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 細(xì)胞生物 細(xì)胞周期蛋白

          地衣紅保存Anti-OR2D3 Antibody研究領(lǐng)域 免疫學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞骨架 細(xì)胞外基質(zhì)

          N-乙基-N-(2-羥基-3-磺丙基)-3,5-二甲氧基苯胺鈉鹽價(jià)格Anti-OR2F2 Antibody研究領(lǐng)域 心血管 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 染色質(zhì)和核信號(hào) 神經(jīng)生物學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子

          亞硫酸鉍瓊脂培養(yǎng)基Bismuth Sulfite Agar MediumAnti-Angiotensin II receptor  補(bǔ)骨脂酚

          馬鈴薯葡萄糖瓊脂Potato Dextrose AgarAnti-ANGPTL1/ANG-1   L-薄荷

          10%溶液10% sterile tartaric acid solutionAnti-ANGPTL2/ANG-2   白屈菜紅堿

          pH7.0 緩沖蛋白胨溶液Buffered Sodium Chloride-peptone Solution pH 7.0Anti-ANGPTL4/ANG-4   DL-薄荷

          流體硫乙酸鹽培養(yǎng)基Fluid Thioglycollate MediumAnti-Annexin A  白花前胡素

          大豆-酪蛋白消化物培養(yǎng)基Soybean-Casein Digest MediumAnti-Annexin II  白花前胡

          抗生素培養(yǎng)基 1 號(hào)Medium 1Penassay Seed AgarAnti-Annexin V  白蠟樹(shù)素

          抗生素培養(yǎng)基 2 號(hào)Medium 2Penassay Base AgarAnti-Annexin V   百蕊草素I

          抗生素培養(yǎng)基 3 號(hào)Medium 3Penassay BrothAnti-AP1  表木栓

          抗生素培養(yǎng)基 4 號(hào)Medium 4Yeast Beef AgarAnti-Apaf-1  扁蓄苷
          睡眠嗜血桿菌PCR檢測(cè)試劑盒規(guī)格Ethyl Vanillate通用試劑 10G

          Iodobenzene,98%表面活性劑 25G

          Benzyl 2-propylacrylate,97%通用試劑 5G

          1-Phenylundecane,97%通用試劑 10ML

          O-Chlorotoluene,99%表面活性劑 100ML

          Bromobenzene,≥99.5%表面活性劑 100ML

          1,2-Dichlorobenzene,99%表面活性劑 100ML

          Undecaic δ-lactone,97%通用試劑 25G

          L-Tyrosine ethyl ester通用試劑 1G

          1,2,4-Trichlorobenzene,≥99%表面活性劑 100ML

          Dysprosium,99.9%表面活性劑 25G

          Ethyl lilenate,80%通用試劑 25ML

          Tris(4-nitrophenyl) Phosphate,98%通用試劑 25G

          Dysprosium oxide,99.9%表面活性劑 5G

          3-(Amimethyl)indole oxalate,95%通用試劑 500MG

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