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          產(chǎn)品中心

          Product Center

          當(dāng)前位置:首頁  -  產(chǎn)品中心  -  PCR試劑盒  -  PCR檢測試劑盒  -  50T鴿副粘病毒PCR檢測試劑盒價(jià)格

          鴿副粘病毒PCR檢測試劑盒價(jià)格

          產(chǎn)品簡介

          鴿副粘病毒PCR檢測試劑盒價(jià)格
          上海聯(lián)祖生物相關(guān)產(chǎn)品:
          CaN檢測試劑盒提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存

          更新時(shí)間:2021-03-13
          訪問次數(shù):593
          詳細(xì)介紹在線留言

          注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

           產(chǎn)品名稱

           鴿副粘病毒PCR檢測試劑盒價(jià)格

           英文名稱

           Pigeon Paramyxovirus(PPMV)RTPCR

           貨號(hào)

           LZP7141

          組成及試劑配制:
          1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
          2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
          3、 樣品稀釋液:1×20ml。
          4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
          5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
          ?
          實(shí)驗(yàn)過程:
          一、試劑準(zhǔn)備
          1. DNA模板
          2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
          3.10×PCR Buffer
          4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
          5.Taq酶
          二、操作步驟
          1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
          10×PCR buffer             5μl
          dNTP mixl                 4μl
          引物1(10pM)               2μl
          引物2(10PM)              2μl
          Taq酶(2U/μl)            1μl
          DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
          ddH2O至               50 μl
          PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
          2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
          3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
          4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
          三、注意事項(xiàng)
          1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行設(shè)立一個(gè)的PCR實(shí)驗(yàn)室。
          2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
          3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
          4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
          5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗(yàn)一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲(chǔ)存,從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。
          6.試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
          7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。
          VD3瑞氏色素 BS苯并噻吩-2-酸  98%

          VK1瑞氏色素 高純級,>97%(HPLC),用于血液和生物學(xué)染色4-叔丁基苯酸 97%

          VK3二甲酚橙 AR4-芐氧基苯酸  97%

          VPP二甲酚橙 高純級4-溴苯酸  97%

          VE4-二乙氨基苯甲 98%3,5-雙(三氟甲基)苯酸 97%

          VE鄰胺 99%3-芐氧基-2,6-二氟苯酸 97%

          Vitamin E acetate對胺 CP,98%2-丁氧基苯酸 97%

          VB1硒粉 99.9% metals basis,200目4-溴-2-(三氟甲基)苯甲 97%

          VB2二異丁基氫化鋁 1.0 M in hexanes4-溴-2-三氟酚 99%

          FMN-Na*基鋁 2.0 M 甲苯溶液4-芐氧基-3-氯苯酸 98%

          FMN-Na二苯 97%5-基-2-氟苯酸 97%

          VB32-氯乙胺鹽酸鹽  98%4-羧基苯酸 97%

          COA甲氧基胺鹽酸鹽 98%2-氯-4-氟苯酸 98%

          VB5甜菜堿,無 98%2-羧基苯酸 97%

          VB6甜菜堿,一 99%2-氯-4-茴香酸 95%

          VB12甜菜堿鹽酸鹽 分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.5%5-氯-2-氟苯酸 97%

          普瑞巴林DMSO (Dimethyl Sulfoxide)Rabbit Anti-pig IgG/Alexa Fluor 350  Alexa Fluor 350標(biāo)記的兔抗豬IgG

          鹽酸卡巴肼/鹽酸甲基芐肼SignalSilence® Fatty Acid Synthase siRNA IIRabbit anti-Pig IgG whole serum  兔抗豬IgG抗血清

          鹽酸卡巴肼(標(biāo)準(zhǔn)品)Vandetanib Rabbit Anti-pig IgG  兔抗豬IgG

          鹽酸卡特羅DLST (D22G7) Rabbit mAbRabbit anti-mouse Kappa light chain/RBITC  羅丹明標(biāo)記的兔抗小鼠k鏈

          泊酚CTR9 (D1Z4F) Rabbit mAbRabbit anti-mouse Kappa light chain/PE-Cy7  PE-Cy7標(biāo)記的兔抗小鼠k鏈

          鹽酸雷洛昔芬β-Actin (D6A8) Rabbit mAb (HRP Conjugate)Rabbit anti-mouse Kappa light chain/PE-Cy5.5  PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗小鼠k鏈

          福多斯坦Btk (D3H5) Rabbit mAb (Biotinylated)Rabbit anti-mouse Kappa light chain/PE-CY5  PE-CY5標(biāo)記的兔抗小鼠k鏈

          福多斯坦(標(biāo)準(zhǔn)品)Acetyl-NF-κB p65 (Lys310) (D2S3J) Rabbit mAbRabbit anti-mouse Kappa light chain/PE-Cy3  PE-Cy3標(biāo)記的兔抗小鼠k鏈

          利塞膦酸SignalFire™ Plus ECL ReagentRabbit anti-mouse Kappa light chain/PE  PE標(biāo)記的兔抗小鼠k鏈

          利塞膦酸(標(biāo)準(zhǔn)品)SignalFire™ Plus ECL ReagentRabbit anti-mouse Kappa light chain/HRP  辣根過氧化物酶標(biāo)記的兔抗小鼠k鏈
          鴿副粘病毒PCR檢測試劑盒價(jià)格人鳥苷酸解離抑制因子(GDI)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:RT25克

          人尿蛋白(UP)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:RT100支/包

          人尿苷二磷酸葡萄糖神經(jīng)酰葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶(UGCG)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:RT1克

          人尿激酶(UK)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:5克

          人尿激酶型纖溶酶原激活物(uPA)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:RT1克

          人尿激酶型纖溶酶原激活物(uPA/PLAU)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:100克

          人尿激酶型纖溶酶原激活物受體(PLAUR/uPAR)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:RT10個(gè)/袋

          人尿嘧啶核苷磷酸化酶1(UPP1)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:RT100克
          檢測步驟:
          一、 試劑的準(zhǔn)備
          從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
          設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個(gè)測試反應(yīng)體系配制如下表:
          試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
          熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
          酶混合物 1 µL N×1 µL
          總量 15 µL N×15µL
          1) 計(jì)算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
          7.2 qPCR反應(yīng)條件
          將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
          推薦循環(huán)條件:
          1循環(huán) 50℃ for 2 min
          預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
          PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
          60℃ for 60 sec
          60℃延伸時(shí)收集熒光信號(hào)。報(bào)告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請勿選擇ROX參比熒光。

           

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