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          當(dāng)前位置:首頁  -  產(chǎn)品中心  -  PCR試劑盒  -  PCR檢測試劑盒  -  50T產(chǎn)紫青霉PCR檢測試劑盒規(guī)格

          產(chǎn)紫青霉PCR檢測試劑盒規(guī)格

          產(chǎn)品簡介

          產(chǎn)紫青霉PCR檢測試劑盒規(guī)格
          上海聯(lián)祖生物相關(guān)產(chǎn)品:
          UPP1檢測試劑盒無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心

          更新時(shí)間:2021-03-13
          訪問次數(shù):631
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          注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

           產(chǎn)品名稱

           產(chǎn)紫青霉PCR檢測試劑盒規(guī)格

           英文名稱

           Penicillium purpurogenumPCR

           貨號

           LZP7128

          組成及試劑配制:
          1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
          2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
          3、 樣品稀釋液:1×20ml。
          4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
          5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
          ?
          實(shí)驗(yàn)過程:
          一、試劑準(zhǔn)備
          1. DNA模板
          2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
          3.10×PCR Buffer
          4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
          5.Taq酶
          二、操作步驟
          1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
          10×PCR buffer             5μl
          dNTP mixl                 4μl
          引物1(10pM)               2μl
          引物2(10PM)              2μl
          Taq酶(2U/μl)            1μl
          DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
          ddH2O至               50 μl
          PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
          2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
          3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
          4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
          三、注意事項(xiàng)
          1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行設(shè)立一個(gè)的PCR實(shí)驗(yàn)室。
          2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
          3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
          4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
          5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗(yàn)一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。
          6.試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
          7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。
          BBIH乙酸香葉酯 96%2,6-二氟-4-羥基苯 98%

          Hoechst 33342乙酸葉酯 98%2,4-二甲酸 98%

          Fluorescein正己 Standard for GC,>99.5%(GC)L-蘋果酸二甲酯 98%

          Fluorescein disodium salt正己 98%2,2-二甲基丁酸 98%

          DAPI正己 分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99.8%(GC)3,3-二甲基烯酸 98%

          Phelphthalein正己 99%2,5-二甲酸 98%

          Phelphthalein test paper正庚酸 Standard for GC3,5-二甲基-4-吡唑 97%

          Phelphthalexone正庚酸 AR,98.0%2,5-二甲基溴苯 98%

          Thymol正庚酸 分析標(biāo)準(zhǔn)品N-基二硫代亞胺碳酸二甲酯 90%

          Rhodamine 123正己酸 Standard for GC, ≥99.5% (GC)L-(-)-二(對甲酰) 97%

          Rhodamine B正己酸 CP,98.0%        3-(二甲氨基)烯酸乙酯 98%

          TMB正己酸 分析標(biāo)準(zhǔn)品3-氨基巴豆酸乙酯 99%

          3,3,5,5-Tetramethyl benzidine solution liquid-1 component正己酸 AR,99.0%硫代草氨酸乙酯 95%

          3,3,5,5-Tetramethyl benzidine solution liquid membrane substrate己酸葉酯 98%乙酸乙酯 98%

          TMB•2HC1己酸葉酯 98%,Kosher 二乙酯 97%

          TMB-US(ultra sensitive) solution正庚 Standard for GC,>99.5%(GC)3-(5-乙基-1,2,4-噁二唑-3-基)苯甲酸 97%

          D-泛酸鈣,維生素B5Immufluorescence Antibody Dilution BufferRBBP6/P2P-R  增殖潛能相關(guān)蛋白抗體

          脫羧氯雷他定/地氯雷他定AUF1/hnRNP D (D6O4F) Rabbit mAbRBBP6  視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤結(jié)合蛋白6抗體

          脫羧氯雷他定/地氯雷他定(標(biāo)準(zhǔn)品)PathScan® Total Caveolin-1 Sandwich ELISA KitRBBP5  視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤結(jié)合蛋白5抗體

          地塞米松磷酸鈉UHRF1 (D6G8E) Rabbit mAbRbAp48  視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤結(jié)合蛋白P48抗體

          地塞米松磷酸鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)BackDrop® Green Background SuppressorRB1CC1  RB1的誘導(dǎo)卷曲蛋白RB1CC1抗體

          磷酸奧司他韋GFAP (D1F4Q) XP® Rabbit mAbRb/P105 RB  成視網(wǎng)膜細(xì)胞瘤基因抗體

          磷酸奧司他韋(標(biāo)準(zhǔn)品)GFAP (D1F4Q) XP® Rabbit mAbRat secretory IgA  分泌型免疫球蛋白A抗體

          鹽酸地布卡因YAP (1A12) Mouse mAbRASSF8  RAS家族關(guān)聯(lián)結(jié)構(gòu)域蛋白8抗體

          多奈哌齊BNIP3L/Nix (D4R4B) Rabbit mAbRASSF7  RAS家族關(guān)聯(lián)結(jié)構(gòu)域蛋白7抗體

          多尼培南(標(biāo)準(zhǔn)品)Phospho-DNAJC2/MPP11 (Ser47) AntibodyRASSF6  RAS家族關(guān)聯(lián)結(jié)構(gòu)域蛋白6抗體
          產(chǎn)紫青霉PCR檢測試劑盒規(guī)格人利什曼原蟲抗體(LeishimariaAb)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:50克

          人粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:RT10克

          人粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSF)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:1米

          人粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子抗體(GM-CSFAb)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:2~8℃100毫升

          人粒細(xì)胞趨化蛋白-2(GCP-2/CXCL6)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:RT支

          人粒細(xì)胞特異性抗核抗體(GS-ANA)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:2~8℃100毫升

          人痢疾內(nèi)阿米巴抗原ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:1克

          人鏈激酶(SK)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:RT25克
          檢測步驟:
          一、 試劑的準(zhǔn)備
          從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
          設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個(gè)測試反應(yīng)體系配制如下表:
          試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
          熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
          酶混合物 1 µL N×1 µL
          總量 15 µL N×15µL
          1) 計(jì)算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
          7.2 qPCR反應(yīng)條件
          將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
          推薦循環(huán)條件:
          1循環(huán) 50℃ for 2 min
          預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
          PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
          60℃ for 60 sec
          60℃延伸時(shí)收集熒光信號。報(bào)告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請勿選擇ROX參比熒光。

           

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