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          當(dāng)前位置:首頁(yè)  -  產(chǎn)品中心  -  PCR試劑盒  -  PCR檢測(cè)試劑盒  -  50T鏈球菌B族PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格

          鏈球菌B族PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格

          產(chǎn)品簡(jiǎn)介

          鏈球菌B族PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格
          上海聯(lián)祖生物相關(guān)產(chǎn)品:
          環(huán)核苷酸陽(yáng)離子通道蛋白α2100 ul

          α1酸性糖蛋白(α1-AGP)ELISA試劑盒CANX 鈣連蛋白20 ul

          α1抗胰糜蛋白酶(AACT)ELISA試劑盒CNP/CNPase

          更新時(shí)間:2021-03-13
          訪問(wèn)次數(shù):509
          詳細(xì)介紹在線留言

          注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

           產(chǎn)品名稱(chēng)

           鏈球菌B族PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格

           規(guī)格

           50T

           貨號(hào)

           LZP7661

          組成及試劑配制:
          1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
          2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋?zhuān)ㄗⅲ翰灰苯釉诎逯羞M(jìn)行倍比稀釋?zhuān)?,分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類(lèi)推。
          3、 樣品稀釋液:1×20ml。
          4、 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml。
          5、 檢測(cè)稀釋液B:1×10ml。
          ?
          實(shí)驗(yàn)過(guò)程:
          一、試劑準(zhǔn)備
          1. DNA模板
          2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無(wú)到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
          3.10×PCR Buffer
          4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
          5.Taq酶
          二、操作步驟
          1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
          10×PCR buffer             5μl
          dNTP mixl                 4μl
          引物1(10pM)               2μl
          引物2(10PM)              2μl
          Taq酶(2U/μl)            1μl
          DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
          ddH2O至               50 μl
          PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
          2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
          3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
          4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
          三、注意事項(xiàng)
          1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒(méi)有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行設(shè)立一個(gè)的PCR實(shí)驗(yàn)室。
          2.純化模板所選用的方法對(duì)污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡(jiǎn)單越好。
          3.所有試劑都應(yīng)該沒(méi)有核酸和核酸酶的污染。操作過(guò)程中均應(yīng)戴手套。
          4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過(guò)濾除菌或高壓滅菌。
          5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗(yàn)一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量?jī)?chǔ)存,從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。
          6.試劑或樣品準(zhǔn)備過(guò)程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
          7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開(kāi),并且要充分混勻。
          依澤替米貝;依折麥布(標(biāo)準(zhǔn)品)C30H42O8Boc-D-基氨酸

          鹽酸甲哌卡因C10H12N4O51,2-雙[2-并[b]噻吩-基]-3,3,4,4,5,5-六氟-1-環(huán)戊

          安普那韋 C18H18O55--2-羥基酮

          魯比替康; 9-硝基喜樹(shù)C20H22N2O314

          泊洛沙姆188,聚氧聚氧共聚物C42H68O13吡啶-甲肟

          泊洛沙姆407C16H25NO2NBD-H (=肼基-7-硝基-2,1,并惡二唑肼)[用于高效液相色譜標(biāo)記](méi)

          長(zhǎng)春質(zhì)C16H9NO6氟

          硫酸長(zhǎng)春質(zhì)C12H12O22-噻吩甲

          硫酸長(zhǎng)春質(zhì)(標(biāo)準(zhǔn)品)C40H36O122,二甲基喹戊啉

          康普瑞汀C28H34O92,5-二甲基己烷

          土霉素C35H58O6比卡魯

          土霉素(進(jìn)分)C16H12O62-(三氟甲氧基)磺酰

          華法林C30H52O3*基氟硅烷

          華法林(標(biāo)準(zhǔn)品)C32H42O162,7-雙(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧戊環(huán)-2-基)芘

          白楊素(標(biāo)準(zhǔn)品)C25H28O16(2-基)

          白楊素C17H16O5芐基基砜

          刺芒柄花素(標(biāo)準(zhǔn)品)C27H44O3(2-氧代-2-基)膦酸二酯

          刺芒柄花素C21H20O62-氟-6-(三氟甲基)溴芐

          αN已酰氨基葡糖苷酶(αNAG)ELISA試劑盒AU5 tag  AU5 tag標(biāo)簽100 ul

          αL巖藻糖苷酶(AFU)ELISA試劑盒AU1 tag  AU1 tag標(biāo)簽100 ul

          αL艾杜糖苷酸酶(IDUA)ELISA試劑盒  Glu-Glu tag100 ul

          α2抗纖溶酶(α2-AP)ELISA試劑盒E Tag  E Tag標(biāo)簽100 ul

          α1微球蛋白(α1-MG)ELISA試劑盒CNGA2  環(huán)核苷酸陽(yáng)離子通道蛋白α2100 ul

          α1酸性糖蛋白(α1-AGP)ELISA試劑盒CANX  鈣連蛋白20 ul

          α1抗胰糜蛋白酶(AACT)ELISA試劑盒CNP/CNPase  C型鈉尿肽100 ul

          α1干擾素(IFN-α1)ELISA試劑盒CNR-1  鈣粘蛋白相關(guān)的神經(jīng)受體1100 ul

          Wnt-3a蛋白(WNT3A)ELISA試劑盒CNTFR Alpha  睫狀神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子受體α100 ug
          鏈球菌B族PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格小鼠DC細(xì)胞5 x 10^5 cells/T25培養(yǎng)瓶

          小鼠DC細(xì)胞5 x 10^5 cells/T25培養(yǎng)瓶

          小鼠NK細(xì)胞5 x 10^5 cells/T25培養(yǎng)瓶

          小鼠T淋巴細(xì)胞5 x 10^5 cells/T25培養(yǎng)瓶

          小鼠膀胱基質(zhì)成纖維細(xì)胞5 x 10^5 cells/T25培養(yǎng)瓶

          小鼠膀胱平滑肌細(xì)胞5 x 10^5 cells/T25培養(yǎng)瓶
          檢測(cè)步驟:
          一、 試劑的準(zhǔn)備
          從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
          設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對(duì)照+1管陽(yáng)性對(duì)照),每個(gè)測(cè)試反應(yīng)體系配制如下表:
          試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
          熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
          酶混合物 1 µL N×1 µL
          總量 15 µL N×15µL
          1) 計(jì)算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對(duì)照(NTC)和陽(yáng)性對(duì)照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
          7.2 qPCR反應(yīng)條件
          將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
          推薦循環(huán)條件:
          1循環(huán) 50℃ for 2 min
          預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
          PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
          60℃ for 60 sec
          60℃延伸時(shí)收集熒光信號(hào)。報(bào)告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請(qǐng)勿選擇ROX參比熒光。

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