組成及試劑配制:
1、酶標(biāo)板：一塊（96孔）
2、 標(biāo)準(zhǔn)品（凍干品）： 2瓶，請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測(cè)稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測(cè)稀釋液B：1×10ml。
注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

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實(shí)驗(yàn)過程：
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2．對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
三、注意事項(xiàng)
１．PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行設(shè)立一個(gè)的PCR實(shí)驗(yàn)室。
２．純化模板所選用的方法對(duì)污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言，只要能夠得到可靠的結(jié)果，純化的方法越簡(jiǎn)單越好。
３．所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
４．PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水，采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
５．試劑都應(yīng)該以大體積配制，試驗(yàn)一下是否滿意，然后分裝成僅夠一次使用的量儲(chǔ)存，從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。
６．試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
７．PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開，并且要充分混勻。檢測(cè)步驟：
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對(duì)照+1管陽性對(duì)照)，每個(gè)測(cè)試反應(yīng)體系配制如下表：
試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
（1） 計(jì)算好各試劑的使用量，加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中，充分混勻，10000rpm離心10s，向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液，向每管中加入處理后樣品或陰性對(duì)照(NTC)和陽性對(duì)照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時(shí)收集熒光信號(hào)。報(bào)告基團(tuán)：設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán)：NONE，請(qǐng)勿選擇ROX參比熒光。
二甲(Standard for GC,≥99.9%(GC)(二甲異構(gòu)體+基）)TIE1 (D2K2T) Rabbit mAb2-氟-甲

氣相色譜儀檢定用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（-甲溶液）(5.00mg/ml,基體:甲)Phospho-Synapsin (Ser9) Antibody氟-2-

液相色譜儀檢定用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(萘-甲溶液)(0.0001g/mL,基體:甲)Synapsin Antibody2-氟-5-甲

氨基吡啶(標(biāo)準(zhǔn)品)Phospho-SirT1 (Ser47) Antibody2,5-二氟甲

順式-4,7,10,13,16,19-二十二碳六酸甲酯(標(biāo)準(zhǔn)品)Phospho-SirT1 (Ser47) Antibody2-氟-5-甲

2,6-二基(DEA)(標(biāo)準(zhǔn)品)c-Jun (L70B11) Mouse mAb2-溴-5-氟甲

順式-5,8,11,14,17-二十碳五酸(標(biāo)準(zhǔn)品)CDK9 (C12F7) Rabbit mAb溴-氟甲

間硝基標(biāo)準(zhǔn)溶液(分析標(biāo)準(zhǔn)品,用于環(huán)境分析,>99.6%(GC))CDK9 (C12F7) Rabbit mAb氟-甲氧基

環(huán)己烷(農(nóng)殘級(jí))OGT (D1D8Q) Rabbit mAb (HRP Conjuga)2-氟肉桂酸

靈(標(biāo)準(zhǔn)品)S6 Ribosomal Proin (54D2) Mouse mAb1H-吲唑-甲酸酯

Celi 硅藻土 545(助濾劑,碳酸鈉處理,通量煅燒)C/EBPδ Antibody5-氟-2-甲

Celi硅藻土，酸洗(用于總膳食纖維含量分析,TDF-100A)C/EBPδ Antibody2-三氟

Celi® 硅藻土545(助濾劑,通量煅燒（filr aid,flux calcined）)NCK1 (15B9) Rabbit mAb2,8-二喹啉

己定(標(biāo)準(zhǔn)品)AP-2γ Antibody硫唑嘌呤

香茅(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.0%(GC))SQSTM1/p62 (D6M5X) Rabbit mAb (Rodent Specific)2--5-酮

多菌靈標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/ml,u=3%)VISTA (D5L5T) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 555 Conjuga)2--5-甲基-硝基吡啶

多菌靈標(biāo)準(zhǔn)溶液(10μg/ml,u=3%)Phospho-MAPK/CDK Substras (PXS*P or S*PXR/K) (34B2) Rabbit mAb順-環(huán)己-1,2-二羧酸

氧酸(標(biāo)準(zhǔn)品)Rap1B (36E1) Rabbit mAb溴-1H-咪唑

S100鈣結(jié)合蛋白A11(S100A11)ELISA試劑盒Phospho-MARCKS (Ser152/156)  酸化丙氨酸蛋白激酶C底物Marcks500µl

RNA結(jié)合蛋白FUS(FUS/TLS)ELISA試劑盒Phospho-MARCKS (Ser162)  酸化丙氨酸蛋白激酶C底物Marcks100 ul

Rho家族GTP酶1(RND1)ELISA試劑盒MAD1  Mad120 ul

Rho關(guān)聯(lián)含卷曲螺旋蛋白激酶2(Rock-2)ELISA試劑盒MAdCAM-1  粘膜血管定居因子1 Kit

Rho GDP解離抑制因子1(ARHGDIA/GDIA1)ELISA試劑盒DAXX  Fas相關(guān)死亡結(jié)構(gòu)域蛋白500 ul

REST協(xié)阻抑因子3(RCOR3)ELISA試劑盒Phospho-FADD (Ser191)   酸化Fas相關(guān)死亡結(jié)構(gòu)域蛋白100 ul

ras同源物基因家族成員b(RHOB)ELISA試劑盒Mafa  v-maf 肌腱膜纖維肉瘤癌基因同源物A100 ul

Q熱科克斯體2(Q fever)(IgM)ELISA試劑盒MAFbx/Fbx32  泛素蛋白連接酶100 ul

Q熱科克斯體2(Q fever)(IgG)ELISA試劑盒MAG-a/b   髓鞘相關(guān)糖蛋白a/b100 ul
水貂腸炎病毒PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格BRPF3蛋白抗體Prunin中文名：普魯寧別名：Naringenin 7-O-glucoside分子式：C21H22O10

BXDC1蛋白抗體8,3'-Diprenylapigenin中文名：8,3'-二異戊烯基芹菜素別名：分子式：C25H26O5

腦蛋白44抗體Cycloheterophyllin中文名：別名：分子式：C30H30O7

腦蛋白44樣蛋白抗體Kurarine中文名：別名：分子式：C26H30O6

嗜乳脂蛋白樣2抗體Linarin中文名：蒙花苷別名：Acaciin; Acacetin 7-O-rutiside分子式：C28H32O14