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          當(dāng)前位置:首頁  -  產(chǎn)品中心  -  PCR試劑盒  -  PCR檢測試劑盒  -  50T豬丹毒桿菌PCR檢測試劑盒規(guī)格

          豬丹毒桿菌PCR檢測試劑盒規(guī)格

          產(chǎn)品簡介

          旁腺激素相關(guān)蛋白500&#181;l

          降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)ELISA試劑盒PTN 多效生長因子100 ul

          降鈣素(CT)ELISA試劑盒PTP/PTPase/CD148 蛋白酪氨酸酸酶

          更新時(shí)間:2021-03-13
          訪問次數(shù):689
          詳細(xì)介紹在線留言

          注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

           產(chǎn)品名稱

           豬丹毒桿菌PCR檢測試劑盒規(guī)格

           規(guī)格

           50T

           貨號

           LZP7896

          組成及試劑配制:
          1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
          2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
          3、 樣品稀釋液:1×20ml。
          4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
          5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
          ?
          實(shí)驗(yàn)過程:
          一、試劑準(zhǔn)備
          1. DNA模板
          2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
          3.10×PCR Buffer
          4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
          5.Taq酶
          二、操作步驟
          1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
          10×PCR buffer             5μl
          dNTP mixl                 4μl
          引物1(10pM)               2μl
          引物2(10PM)              2μl
          Taq酶(2U/μl)            1μl
          DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
          ddH2O至               50 μl
          PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
          2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
          3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
          4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
          三、注意事項(xiàng)
          1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行設(shè)立一個(gè)的PCR實(shí)驗(yàn)室。
          2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
          3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
          4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
          5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗(yàn)一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。
          6.試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
          7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。
          (1,1,3,四甲基丁基)酚(>93.0%(GC))CACYBP Antibody羧基酸

          2,2-雙(羥基)烷(>99.0%(GC))Phospho-CaMKII (Tyr231) Antibody2--(三氟甲基)酸

          2,2-雙()-1,1-二烷(>98.0%(GC))CaMKII-α Antibody芐基酮

          2,2-雙()-1,1-二(>99.0%(GC))PI3 Kinase Class III (D4E2) Rabbit mAb6-溴己酸酯

          2,二酚(>98.0%(GC))PI3 Kinase Class III (D4E2) Rabbit mAb三氟甲酸甲酯

          2,二酚(>98.0%(GC))ATF-3 (D2Y5W) Rabbit mAb溴

          1,2-二溴-烷(1mg/mL的甲溶液)Phospho-TORC1/CRTC1 (Ser151) Antibody氟硫酚

          鄰二甲酸丁芐酯(>97.0%(GC))RagC Antibody2-氨基-2-基丁酸

          鄰二甲酸二戊酯(>98.0%(GC))CaMKII (pan) Antibody聚磺酸鈉

          鄰二甲酸二丁酯(>97.0%(GC))Sox9 (D8G8H) Rabbit mAb (Biotinylad)甲氨基鹽酸鹽

          鄰二甲酸二環(huán)己酯(>99.0%(GC))Dicer Antibody氨基-2,6-二吡啶

          鄰二甲酸二酯(>98.0%(GC))Dicer Antibody2-(N-Boc-哌啶基)

          鄰二甲酸雙(2-基己基)酯(>98.0%(GC))Drosha (D28B1) Rabbit mAbBoc-L-蘇氨酸

          鄰二甲酸二酯(>98.0%(GC))Drosha (D28B1) Rabbit mAb(R)-2-氨甲基-1-N-Boc-吡咯烷

          鄰二甲酸二己酯(>98.0%(GC))CaMKI-δ Antibody10-氮(雜)蒽

          三丁基化錫(>97.0%(T))Neuropilin-2 (D39A5) XP® Rabbit mAb-2-氟酚

          3,并芘(升華精制品)(>95.0%(GC))Neuropilin-2 (D39A5) XP® Rabbit mAb-氟酚

          (酰)二硫化物(>98.0%(HPLC))GST (26H1) Mouse mAb (Alexa Fluor® 488 Conjuga)2-甲基-6-三氟甲基吡啶-羧酸

          角化細(xì)胞生長因子(KGF)ELISA試劑盒PN/MMAC1(CT)  一種腫瘤抑制基因(C端)20 ul

          角化細(xì)胞內(nèi)分泌因子(KAF)/雙調(diào)蛋白(AR)ELISA試劑盒Phospho-PN (Ser380)  酸化腫瘤抑制基因PN100 ul

          膠質(zhì)細(xì)胞系來源的神經(jīng)營養(yǎng)因子(GDNF)ELISA試劑盒Phospho-PN (Ser380/Thr382/Thr383)  酸化腫瘤抑制基因PN100 ul

          膠原吡啶交聯(lián)(PYD)ELISA試劑盒PGE2  E220 ul

          膠原C末端肽(CTX)ELISA試劑盒PTGEs  E合成酶100 ul

          降鈣素原(PCT)ELISA試劑盒PTHrP/PTHLH  甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白500µl

          降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)ELISA試劑盒PTN  多效生長因子100 ul

          降鈣素(CT)ELISA試劑盒PTP/PTPase/CD148  蛋白酪氨酸酸酶CD148100 ul

          性酸酶(ALP)ELISA試劑盒PTP-1B  蛋白酪氨酸酸酶-1B100 ul
          豬丹毒桿菌PCR檢測試劑盒規(guī)格唇裂和腭裂相關(guān)跨膜蛋白1抗體Bisisorhapontigenin A中文名:別名:分子式:C30H26O8

          趨化素樣因子超家族成員8抗體Gnetifolin A中文名:別名:分子式:C16H14O6

          趨化素樣因子超家族成員1抗體Isocalophyllic acid中文名:別名:分子式:C25H24O6

          神經(jīng)細(xì)胞蠟樣質(zhì)脂褐質(zhì)沉積病蛋白CLN6抗體Calophyllic acid中文名:別名:分子式:C25H24O6

          神經(jīng)細(xì)胞蠟樣質(zhì)脂褐質(zhì)沉積病蛋白CLN3抗體(3S,5S)-[4]-Gingerdiol中文名:別名:分子式:C15H24O4
          檢測步驟:
          一、 試劑的準(zhǔn)備
          從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
          設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個(gè)測試反應(yīng)體系配制如下表:
          試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
          熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
          酶混合物 1 µL N×1 µL
          總量 15 µL N×15µL
          1) 計(jì)算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
          7.2 qPCR反應(yīng)條件
          將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
          推薦循環(huán)條件:
          1循環(huán) 50℃ for 2 min
          預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
          PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
          60℃ for 60 sec
          60℃延伸時(shí)收集熒光信號。報(bào)告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請勿選擇ROX參比熒光。

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