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          當(dāng)前位置:首頁  -  產(chǎn)品中心  -  PCR試劑盒  -  PCR檢測試劑盒  -  50T爾斯布朗病毒PCR檢測試劑盒規(guī)格

          爾斯布朗病毒PCR檢測試劑盒規(guī)格

          產(chǎn)品簡介

          爾斯布朗病毒PCR檢測試劑盒規(guī)格
          上海聯(lián)祖生物相關(guān)產(chǎn)品:
          人乳腺癌標(biāo)志物-CA153 檢測試劑盒各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
          標(biāo)記的免疫測定的敏感度可提高數(shù)千倍,達(dá)ng/ml水平。在測定血清中某一物質(zhì)的含量時(shí),化學(xué)比色法的敏感度為mg/ml水平,酶反應(yīng)測定法的敏感度約為5~10μg/ml,免疫測定中凝膠

          更新時(shí)間:2021-03-13
          訪問次數(shù):615
          詳細(xì)介紹在線留言

          組成及試劑配制:
          1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
          2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
          3、 樣品稀釋液:1×20ml。
          4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
          5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
          注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

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           產(chǎn)品名稱

           爾斯布朗病毒PCR檢測試劑盒規(guī)格

           英文名稱

           Wesselsbron Virus PCR

           貨號

           LZP7464

          實(shí)驗(yàn)過程:
          一、試劑準(zhǔn)備
          1. DNA模板
          2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
          3.10×PCR Buffer
          4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
          5.Taq酶
          二、操作步驟
          1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
          10×PCR buffer             5μl
          dNTP mixl                 4μl
          引物1(10pM)               2μl
          引物2(10PM)              2μl
          Taq酶(2U/μl)            1μl
          DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
          ddH2O至               50 μl
          PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
          2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
          3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
          4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
          三、注意事項(xiàng)
          1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行設(shè)立一個(gè)的PCR實(shí)驗(yàn)室。
          2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
          3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
          4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
          5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗(yàn)一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。
          6.試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
          7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。檢測步驟:
          一、 試劑的準(zhǔn)備
          從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
          設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個(gè)測試反應(yīng)體系配制如下表:
          試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
          熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
          酶混合物 1 µL N×1 µL
          總量 15 µL N×15µL
          1) 計(jì)算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
          7.2 qPCR反應(yīng)條件
          將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
          推薦循環(huán)條件:
          1循環(huán) 50℃ for 2 min
          預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
          PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
          60℃ for 60 sec
          60℃延伸時(shí)收集熒光信號。報(bào)告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
          Carbon ActivatedN-Fmoc-S-(4-甲氧基芐基)-L-半胱氨酸  98%烯效唑 分析標(biāo)準(zhǔn)品97.5%

          Acid red 66Fmoc-S-叔丁基-L-半胱氨酸 98%乙烯菌核利 分析標(biāo)準(zhǔn)品,99%

          m-Cresol purpleFmoc-L-谷氨酸γ芐脂 BR乙烯菌核利標(biāo)準(zhǔn)溶液100μg/ml,u=2%,溶劑:酮

          Diphenylaminesulfonic acid sodium saltN-芴甲氧羰基-D-谷氨酸 gamma-叔丁酯 98%乙烯菌核利標(biāo)準(zhǔn)溶液10μg/ml,u=2%,溶劑:酮

          Chicago sky blue 6BN-Fmoc-N'-三苯甲基-L-組氨酸 98%滅草猛 分析標(biāo)準(zhǔn)品,97%

          MucicarmineN,N'-雙(9-芴甲氧羰基)-L-組氨酸 98%滅草猛 分析標(biāo)準(zhǔn)品

           

          Methyl blueFmoc-L-異亮氨酸 98.5%二甲基硅油DC-200 GC,粘度~350 mPa.s, neat(25 °C)

          AMCFmoc-D-亮氨酸 BR二甲基硅油DC-200 粘度~10 mPa.s, neat(25 °C)

          CoumarinFmoc-(2-氯芐氧基羰基)賴氨酸 98.5%二甲基硅油DC-200 粘度~20 mPa.s, neat(25 °C)

          AzophloxineFmoc-N'-三氟乙?;?L-賴氨酸 96%二甲基硅油DC-200 粘度~50 mPa.s, neat(25 °C)

          Pyrosine BFmoc-D-脯氨酸 BR二甲基硅油DC-200 粘度~100 mPa.s, neat(25 °C)

          LCVFmoc-O-叔丁基-D-絲氨酸 98%二甲基硅油DC-200 粘度~200 mPa.s, neat(25 °C)

          Leucomalachite GreenFmoc-O-芐基-L-絲氨酸 98%二甲基硅油DC-200 粘度~500 mPa.s, neat(25 °C)

          Carbol fuchsinFMOC-O-叔丁基-L-絲氨酸  98%二甲基硅油DC-200 粘度~1000 mPa.s, neat(25 °C)

          Erioglaucine disodium saltFmoc-O-三苯甲基-L-絲氨酸 98%  二甲基硅油DC-200 粘度~30000 mPa.s, neat(25 °C)

          CalmagiteFmoc-O-三苯甲基-L-蘇氨酸 99%二甲基硅油DC-200 粘度~60000 mPa.s, neat(25 °C)

          甲酸銨(用于質(zhì)譜,≥99.0%)Cdc6 (C42F7) Rabbit mAbMouse Anti-Guinea pig IgG/AP  堿性磷酸酶(AP)標(biāo)記的小鼠抗豚鼠IgG

          苯甲(色譜級, ≥99.5%(GC))Cdc6 (C42F7) Rabbit mAbMouse Anti-Guinea pig IgG/Alexa Fluor 647  Alexa Fluor 647標(biāo)記的小鼠抗豚鼠IgG

          甲基叔丁基(農(nóng)殘級,≥99.9%(GC))RRM1 AntibodyMouse Anti-Guinea pig IgG/Alexa Fluor 555  Alexa Fluor 555標(biāo)記的小鼠抗豚鼠IgG

          甲基叔丁基(GC,≥99.9%(GC))LPP (8B3A11) Mouse mAbMouse Anti-Guinea pig IgG/Alexa Fluor 488  Alexa Fluor 488標(biāo)記的小鼠抗豚鼠IgG

          二氯(農(nóng)殘級,≥99.9%,,含50-150ppm戊烯穩(wěn)定劑)Vimentin (5G3F10) Mouse mAbMouse Anti-Guinea pig IgG/Alexa Fluor 350  Alexa Fluor 350標(biāo)記的小鼠抗豚鼠IgG

          1,4-二氧六環(huán)(農(nóng)殘級)Phospho-c-Kit (Tyr719) AntibodyMouse Anti-Guinea pig IgG  小鼠抗豚鼠IgG

          化銫(用于高通量質(zhì)譜,99.9995%)Phospho-c-Kit (Tyr719) AntibodyMouse Anti-Goat IgG/RBITC  羅丹明標(biāo)記的小鼠抗羊IgG

          氯苯(for HPLC, ≥99.5%)Phospho-c-Kit (Tyr719) AntibodyMouse Anti-Goat IgG/PE-Cy7  PE-Cy7標(biāo)記的小鼠抗羊IgG

          1,3-二甲基-2-咪唑啉酮(用于GC-HS,≥99.8%(GC))RYBP AntibodyMouse Anti-Goat IgG/PE-Cy5.5  PE-Cy5.5標(biāo)記的小鼠抗羊IgG

          二甲基亞砜(農(nóng)殘級)c-Kit AntibodyMouse Anti-Goat IgG/PE-CY5  PE-CY5標(biāo)記的小鼠抗羊IgG
          爾斯布朗病毒PCR檢測試劑盒規(guī)格羥類固醇脫氫酶17β抗體Coronarin E中文名:別名:15,16-Epoxy-8(17),11,13(16),14-labdatetraene分子式:C20H28O

          同源盒蛋白PRH抗體Scutebata B中文名:別名:分子式:C35H3910

          透明質(zhì)酸合成酶1抗體Adenanthin中文名:腺花素別名:分子式:C26H34O9

          透明質(zhì)酸結(jié)合蛋白4抗體Echiphyllin C中文名:別名:分子式:C20H293

          A型流感病毒H5N1凝集素抗體Scutebata F中文名:別名:Barbatine C分子式:C30H379

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