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          西尼羅病毒PCR檢測試劑盒價格

          產(chǎn)品簡介

          西尼羅病毒PCR檢測試劑盒價格
          上海聯(lián)祖生物相關(guān)產(chǎn)品:
          SP-B檢測試劑盒本試劑不同批號組分不得混用。顯色劑B請避光保存。設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;

          更新時間:2021-03-13
          訪問次數(shù):508
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          ?
          注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

           產(chǎn)品名稱

           西尼羅病毒PCR檢測試劑盒價格

           英文名稱

           West Nile Virus(WNV)RTPCR

           貨號

           LZP7465

          實(shí)驗(yàn)過程:
          一、試劑準(zhǔn)備
          1. DNA模板
          2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
          3.10×PCR Buffer
          4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
          5.Taq酶
          二、操作步驟
          1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
          10×PCR buffer             5μl
          dNTP mixl                 4μl
          引物1(10pM)               2μl
          引物2(10PM)              2μl
          Taq酶(2U/μl)            1μl
          DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
          ddH2O至               50 μl
          PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
          2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
          3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
          4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
          三、注意事項(xiàng)
          1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行設(shè)立一個的PCR實(shí)驗(yàn)室。
          2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
          3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
          4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
          5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗(yàn)一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。
          6.試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
          7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。檢測步驟:
          一、 試劑的準(zhǔn)備
          從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
          設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應(yīng)體系配制如下表:
          試劑 每個反應(yīng)加入的量 N個反應(yīng)加入的量
          熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
          酶混合物 1 µL N×1 µL
          總量 15 µL N×15µL
          1) 計(jì)算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
          7.2 qPCR反應(yīng)條件
          將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
          推薦循環(huán)條件:
          1循環(huán) 50℃ for 2 min
          預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
          PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
          60℃ for 60 sec
          60℃延伸時收集熒光信號。報告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
          組成及試劑配制:
          1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
          2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
          3、 樣品稀釋液:1×20ml。
          4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
          5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
          Acridine redN-alpha-芴甲氧羰基-N-in-叔丁氧羰基-L-色氨酸 97.0%硫酸鋅,一 Zn≥ 35.5%

          Cresyl Violet acetateFmoc-L-酪氨酸 97%吲哚-3-甲 97%

          LumilFmoc-O-芐基-L-酪氨酸 98%氯化鋯 ≥99.99% metals basis

          Lumil sodium saltFmoc-O-叔丁基-L-酪氨酸 98%二甲基硅油   用于油浴,180°C

          ABTS diammonium saltFmoc-O-叔丁基-D-酪氨酸 99%氧化鋅 AR,99%

          ABTS substrate liquidFmoc-D-纈氨酸 98%氧化鋅 CP,99%

          Celestine blue BFMOC-L-氨酸五氟苯酯   98%氧化鋅 電子級

          HDCBSN-[(9H-芴-9-氧基)羰基]-D-氨酸五氟苯酯  98%氧化鋅 99.999% metals basis

          AMSFmoc-D-Arg(Pbf)-OH 98%氧化鋅 SP

          TBHBAN'-(4-甲氧基-2,3,6-三磺?;?-D-精氨酸 98%氧化鋅 99.99% metals basis

          NTAN-Fmoc-N'-(均*苯-2-磺酰基)-L-精氨酸  96%氧化鋅 分析標(biāo)準(zhǔn)品,絡(luò)合量:12.280mmol/g

          Hematin chlorideFMOC-L-天冬氨酸五氟苯酯  98.5%氧化鋅 藥典級(Ph. Eur., BP, USP, 99-100.5%)

          4-CNL-天門冬二氨酸 98%四丁基氟化銨,三 90%

          1-NaphtyolN-Fmoc-N'-三苯甲基-D-天冬酰胺 98%四丁基乙酸銨 97%

          2-NaphtholFmoc-L-天冬氨酸-1芐脂 98.5%乙酸鈉,三 AR,99%

          PyrocatecholN-芴甲氧羰基-L-天冬氨酸 1-芴甲基酯 98%乙酸鈉,三 CP,98%

          鄰苯二甲酸二甲酯(色譜固定液)JMJD2A (C70G6) Rabbit mAbMouse Anti-Goat IgG/PE-Cy3  PE-Cy3標(biāo)記的小鼠抗羊IgG

          十二烷基*基氯化銨(DTAC)(99%,離子對色譜級)SWAP70 (D5O6A) Rabbit mAbMouse Anti-Goat IgG/PE  PE標(biāo)記的小鼠抗羊IgG

          正庚烷(農(nóng)殘級,≥99%(GC))NHERF1 (A310) AntibodyMouse Anti-Goat IgG/HRP  辣根過氧化物酶標(biāo)記的小鼠抗羊IgG

          (農(nóng)殘級,≥99.8%)Branched Ubiquitin Antibody Sampler KitMouse Anti-Goat IgG/Gold  膠體金標(biāo)記的小鼠抗羊IgG

          異辛烷(農(nóng)殘級,>99.5%(GC))LRP6 (C47E12) Rabbit mAbMouse Anti-Goat IgG/FITC  FITC標(biāo)記的小鼠抗羊IgG

          乙胺(色譜固定液,30℃)LRP6 (C47E12) Rabbit mAbMouse Anti-Goat IgG/Cy7  Cy7標(biāo)記的小鼠抗羊IgG

          (for HPLC,≥99.9%)TCF8/ZEB1 (D80D3) Rabbit mAbMouse Anti-Goat IgG/Cy5.5  Cy5.5標(biāo)記的小鼠抗羊IgG

          (農(nóng)殘級, ≥99.9%)TCF8/ZEB1 (D80D3) Rabbit mAbMouse Anti-Goat IgG/Cy5  Cy5標(biāo)記的小鼠抗羊IgG

          (LC-MS,≥99.9%)SHP-2 (D50F2) Rabbit mAbMouse Anti-Goat IgG/Cy3  Cy3標(biāo)記的小鼠抗羊IgG

          二十酸甲酯(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.0% (GC))SHP-2 (D50F2) Rabbit mAbMouse Anti-Goat IgG/Bio  生物素標(biāo)記的小鼠抗羊IgG
          西尼羅病毒PCR檢測試劑盒價格熱休克蛋白受體家族蛋白7B2抗體7-O-Acetylbonducellpin C中文名:別名:分子式:C25H34O8

          Heme結(jié)合蛋白2抗體Bonducellpin D中文名:別名:分子式:C22H28O7

          肝細(xì)胞粘附分子2抗體12-Acetoxyabietic acid中文名:別名:分子式:C22H32O4

          氨基己糖苷酶D抗體Teuvincene H中文名:別名:分子式:C20H20O6

          HHLA2蛋白抗體Triptodiol中文名:別名:Triptonediol分子式:C21H30O4

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