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          當前位置:首頁  -  產品中心  -  PCR試劑盒  -  熒光-PCR法  -  48T馬傳染性貧血(EIAV)核酸試劑盒規(guī)格

          馬傳染性貧血(EIAV)核酸試劑盒規(guī)格

          產品簡介

          潑尼松Clathrin Heavy Chain (D3C6) XP&#174; Rabbit mAb甲基酸頻哪酯

          甲基潑尼松(標準品)TNFRSF17/BCMA Antibody對叔丁基酮

          阿普斯特;CC10004RalA (D6G8) Rabbit mAbS-基丁氨酸

          L-(-)-葡萄糖(

          更新時間:2021-03-13
          訪問次數:690
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          組成及試劑配制:
          1、酶標板:一塊(96孔)
          2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
          3、 樣品稀釋液:1×20ml。
          4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
          5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
          注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。

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           產品名稱

           馬傳染性貧血(EIAV)核酸試劑盒規(guī)格

           規(guī)格

           48T

           貨號

           LZP8032

          實驗過程:
          一、試劑準備
          1. DNA模板
          2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
          3.10×PCR Buffer
          4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
          5.Taq酶
          二、操作步驟
          1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
          10×PCR buffer             5μl
          dNTP mixl                 4μl
          引物1(10pM)               2μl
          引物2(10PM)              2μl
          Taq酶(2U/μl)            1μl
          DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
          ddH2O至               50 μl
          PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
          2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
          3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
          4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
          三、注意事項
          1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行設立一個的PCR實驗室。
          2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
          3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
          4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
          5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
          6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
          7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。檢測步驟:
          一、 試劑的準備
          從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
          設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
          試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
          熒光PCR反應液 14µL N×14µL
          酶混合物 1 µL N×1 µL
          總量 15 µL N×15µL
          1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
          7.2 qPCR反應條件
          將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
          推薦循環(huán)條件:
          1循環(huán) 50℃ for 2 min
          預變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
          PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
          60℃ for 60 sec
          60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
          氨芬酸鈉(標準品)HER4/ErbB4 (111B2) Rabbit mAb2-氟-6-甲氧基

          地塞米松環(huán)氧水解物HER4/ErbB4 (111B2) Rabbit mAbN-基馬來酰亞

          2,6-二叔丁基對甲酚,丁基羥, 抗氧劑 BHT Clathrin Heavy Chain (D3C6) XP® Rabbit mAb硝酸釓

          甲基潑尼松Clathrin Heavy Chain (D3C6) XP® Rabbit mAb甲基酸頻哪酯

          甲基潑尼松(標準品)TNFRSF17/BCMA Antibody對叔丁基酮

          阿普斯特;CC10004RalA (D6G8) Rabbit mAbS-基丁氨酸

          L-(-)-葡萄糖(標準品)RIP3 (D4G2A) Rabbit mAb (PE Conjuga)2-溴-5-氟甲

          7-酮基去氫表雄酮SMC1 Antibody2-氟-甲氧基

          硝酸銣Phospho-S6 Ribosomal Proin (Ser235/236) (D57.2.2E) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjuga)鄰三氟甲氧基甲

          CHIR-99021 (CT99021.HCl)SQSTM1/p62-like Receptor Antibody Sampler Kit鄰氨基

          -3,5-二甲酚,對間二甲酚DCBLD2 AntibodyFmoc-2-氨基異丁酸

          駱駝蓬;駱駝蓬靈;哈梅靈(標準品)Phospho-SMC1 (Ser957) (5D11G5) Mouse mAb2-基吲哚

          阿卡地新(AICAR)Phospho-NF-κB p105 (Ser933) (18E6) Rabbit mAb吉西他濱

          蒲公英萜;蒲公英賽(標準品)Stat5a (4H1) Mouse mAb并噻吩

          琥珀酸普卡必利Phospho-NF-κB p105 (Ser933) (178F3) Rabbit mAb (IHC Specific)5-硝基

          鹽酸納洛酮Phospho-NF-κB2 p100 (Ser866/870) Antibody3,4,5-*氧基

          硝酸布康唑Phospho-NF-κB2 p100 (Ser866/870) Antibody[1,1'-雙(二基膦)二茂鐵]二化鈀二絡合物

          NVP-BKM120Phospho-NF-κB2 p100 (Ser866/870) Antibody2-氟甲

          鴨抗凝血素(aPT1/aPT2)ELISA試劑盒ATR/ACTR(phospho Ser428) /FITC  熒光素標記兔抗、大、ATRIgG20 ul

          鴨極低密度脂蛋白(VLDL)ELISA試劑盒ATF2/FITC  熒光素標記活化復制因子2IgG100 ul

          鴨環(huán)酸腺苷(cAMP)ELISA試劑盒phospho-ATF2(Thr69/71) /FITC  熒光素標記兔抗、大、、猴酸化活化復制因子2(phospho ATF 2)IgG100 ul

          鴨環(huán)酸鳥苷(cGMP)ELISA試劑盒ATF3/FITC  熒光素標記活化轉錄因子3IgG100 ul

          鴨白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA試劑盒ATF4/FITC  熒光素標記活化轉錄因子4IgG100 ul

          鴨白介素6(IL-6)ELISA試劑盒ATF6/FITC  熒光素標記活化轉錄因子6IgG100 ul

          鴨白介素4(IL-4)ELISA試劑盒ATG1/ULK1/FITC  熒光素標記自噬相關蛋白1IgG20 ul

          鴨白介素2(IL-2)ELISA試劑盒ATG7/FITC  熒光素標記自噬相關蛋白7IgG100 ul

          鴨白介素1(IL-1)ELISA試劑盒thrombin II /FITC  熒光素標記凝血酶ⅡIgG100 ul
          馬傳染性貧血(EIAV)核酸試劑盒規(guī)格甲狀腺激素受體共激活蛋白抗體8-Prenyldaidzein中文名:8-異戊烯基大豆苷元別名:分子式:C20H18O4

          堿性核蛋白1/鋅指蛋白basonuclin抗體Barpisoflavone A中文名:別名:2'-Hydroxyisoprunetin分子式:C16H12O6

          癌膜蛋白11抗體(前梯度同源蛋白2)Erythrinin G中文名:別名:分子式:C20H18O6

          酪氨酸蛋白激酶6/腫瘤激酶抗體Isolicoflavol中文名:異甘草黃酮醇別名:分子式:C20H18O6

          骨堿性磷酸酶抗體Demethylvestitol中文名:別名:分子式:C15H14O4

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